ELISA试剂盒【hé】试【shì】验固相载体的选择：很多物质可作【zuò】为【wéi】固相【xiàng】载体，如聚氯乙烯【xī】、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维【wéi】素等【děng】。

包被抗体（或抗原【yuán】）的选【xuǎn】择【zé】：将抗体【tǐ】（或抗原）吸附在固相载体表面【miàn】时，恳求【qiú】纯度要好,吸附时通常恳求PH在9.0～9.6之【zhī】间。
吸附【fù】温度【dù】，时间及其蛋白量也有一定影【yǐng】响,通常【cháng】多选用4℃ 18～24小时。
有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应留心防护。
其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
如今常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。
不管何【hé】种载体，在【zài】运用前均【jun1】可进【jìn】行【háng】选择【zé】：用等量抗原包被，在同【tóng】一【yī】试验条件下进行反【fǎn】应，查询其【qí】显【xiǎn】色反应是不是均一性，据此判明其【qí】吸附功能是不是出色。
正式试验时，应分别以【yǐ】阳性对【duì】照与阴【yīn】性【xìng】对照控制试验【yàn】条件，待【dài】检样品应作一【yī】式二份，以【yǐ】保证试验【yàn】作用的性。

ELISA试剂盒试验条件的选择
在ELISA中，进行各项试验条件的选择是很首要的，其间包括:
有条件者应运用不【bú】致【zhì】癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和【hé】ABTS是【shì】如今较为【wéi】满意【yì】的供氢体【tǐ】。
底物作用一段时间后，应参与强酸或强碱以中止反应。
通常底物作用时间，以9-24分钟为宜。
底物运用液有必要新鲜，尤其是H2O2在临用前参与。
然后再【zài】固定其它条件或采纳“方阵法”（包被物【wù】、待检样品的参看品及【jí】酶符【fú】号抗【kàng】体分【fèn】别为【wéi】不一样的稀释度）在正式【shì】试验系统【tǒng】里地滴【dī】定其工作浓度。
有时【shí】本底【dǐ】较高，说明有非特异性反应，可【kě】选用【yòng】羊血清、兔血清或BSA等【děng】封闭。
酶的【de】底物及供氢体的选【xuǎn】择：对供【gòng】氢体的选择恳【kěn】求是价廉、安【ān】全、有明显地显【xiǎn】色反应，而本【běn】身无色。
蛋白质【zhì】包【bāo】被的适浓度【dù】需进行滴定：即用不一样的蛋白【bái】质浓度【dù】（0.1、1.0和【hé】10μg/ml等）进行【háng】包被后，在其它试验条件相一【yī】起，查询阳性标【biāo】本【běn】的OD值。
选择OD值大而蛋【dàn】白量少的浓度【dù】。关于多数【shù】蛋白质【zhì】来说【shuō】通常为1～10μg/ml。

ELISA试剂盒【hé】试验【yàn】酶符号抗【kàng】体工作浓度的选【xuǎn】择：首先用直【zhí】接ELISA法进行【háng】开【kāi】始效价的滴定（见酶符号【hào】抗体部份）。