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冻存过的全血为什么不建议再拿来做ELISA实验
更新时间【jiān】:2024-9-25   点击次数:1883次

很【hěn】多ELISA实验新【xīn】手客户【hù】都会咨询我司技术能【néng】否把全血提【tí】取出来放【fàng】-70℃条件【jiàn】保存,等实验开展了(比如一个月左右的时间)再离心全血取血【xuè】清或者血浆【jiāng】做【zuò】ELISA实【shí】验?这【zhè】种做法我司【sī】技术都【dōu】是持反对建议的。与【yǔ】此同时,也【yě】是明确【què】要求我司销售【shòu】人员在与【yǔ】客户售前沟通时建【jiàn】议老【lǎo】师【shī】全血样本提取好了应该及时离心出血清或【huò】者【zhě】血浆【jiāng】。并要求-70℃条【tiáo】件下保存,如【rú】果一个月左右可以【yǐ】开【kāi】展实验可以-20℃保【bǎo】存,期间【jiān】不【bú】能反复冻融。至于冻存后的全血不可以再提取血清、血浆样本来做elisa的具【jù】体原【yuán】因如下:

1.全血【xuè】冻存后【hòu】解【jiě】冻,用常规离心方式提取血清【qīng】仍然是可以的,不利【lì】的【de】一点【diǎn】是,伴随冻融的过程,会出现【xiàn】比较严【yán】重的溶血事件。而后提取出来的【de】血清【qīng】能否做【zuò】elisa,主要取决于溶血【xuè】程度、你所要检测的目标蛋白的【de】性质及你实验的目的。

2.溶血释放的胞内组分【fèn】往往容易影【yǐng】响本底,甚至【zhì】出【chū】现假阳性;而蛋【dàn】白酶的释放可能【néng】导致目【mù】的蛋白的降解影响结果;目的【de】蛋白【bái】的大小、稳定【dìng】性、特异性(相对抗体而【ér】言)又影响其自身与酶标板的吸【xī】附、自身降解、自【zì】身【shēn】与抗体的结合率【lǜ】等等。以上【shàng】各种【zhǒng】不确定性因素存在【zài】下,如果你【nǐ】只是对【duì】血【xuè】清中某种血清蛋白做定性检测的话,做elisa应该问题不大【dà】;若【ruò】是定量分析的话,从可【kě】靠性【xìng】的角度上看,不【bú】建议该【gāi】做【zuò】法【fǎ】。

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