兔肿瘤坏死因子-a ELISA检测试剂盒

产品名称：兔肿瘤坏死因子-a ELISA检测试剂盒

品　 牌：酶联生物

规    格：96T/48T

分    类：兔ELISA检测试剂盒

价    格：询价

特    点【diǎn】：灵敏性【xìng】高、特异性强【qiáng】、重【chóng】复性好

运输方面：现货供应

保存温度：低温保存

实验前注意：

1、保证充分的孵育时间和温度。

2、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

3、在混合或溶解蛋白溶液时，避免泡沫产生。

4、在实验开始之前，安排好实验流程。

5、在实验开始之前，清洁工作台。

6、检查不稳定【dìng】或者变质的【de】试剂溶液【yè】（比如沉淀或变色【sè】），有【yǒu】些试剂，比如标准品稀释液或【huò】者检 测稀【xī】释液，可能在设【shè】计时【shí】就含有沉淀物。

7、所有试剂在滴入酶标板之【zhī】前，必【bì】需充分混【hún】匀，而由 于【yú】沉【chén】淀物的【de】特【tè】性，在加入酶标板【bǎn】之前，必需不停搅拌。

操作详情：

1、使用【yòng】前【qián】，将所【suǒ】有试剂充分混【hún】匀【yún】，不要使液体产生大量【liàng】的泡沫，以免加【jiā】样时加入大量的气【qì】泡【pào】，产生加样上的误【wù】差。

2、根【gēn】据待【dài】测样品数【shù】量加上标准品的数量决定所【suǒ】需的板条【tiáo】数，每【měi】个标准品和【hé】空白孔建议做复孔，每个样品根据【jù】自己的【de】数量来【lái】定，能使用复【fù】孔的尽量做复孔。

3、加【jiā】入稀释好后的标【biāo】准品50ul于【yú】反应孔【kǒng】、加入待测样品【pǐn】50ul于反应【yīng】孔内，立【lì】即加入50ul的生【shēng】物-素【sù】标记【jì】的抗体，盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育45分钟。

4、甩去孔内【nèi】液体，每孔【kǒng】加满【mǎn】洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩去洗【xǐ】涤【dí】液，用吸水【shuǐ】纸拍干【gàn】，重复此操作4次，如果用洗【xǐ】板机洗涤，洗涤【dí】次数增加一次。

5、每孔加入100ul的亲和【hé】链【liàn】酶素-HRP，轻轻振荡混匀【yún】，37℃温育30分钟。

6、甩【shuǎi】去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒【miǎo】，甩去洗涤液【yè】，用吸水纸拍干【gàn】，重复此操【cāo】作4次，如果【guǒ】用【yòng】洗【xǐ】板机洗涤，洗涤【dí】次数【shù】增加一次。

7、每孔加入底物A、B各【gè】50ul，轻【qīng】轻振荡混匀，37℃温育5分钟，避【bì】免【miǎn】光照。

8、取出酶标板，迅速【sù】加【jiā】入50ul终止【zhǐ】液，加入终止液后应【yīng】立即测【cè】定【dìng】结果。

9.在933nm波长处测定各孔的OD值。

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