小鼠肿瘤坏死因子a ELISA检测试剂盒

产品名称：小鼠肿瘤坏死【sǐ】因【yīn】子【zǐ】a  ELISA检测试剂盒

品　 牌：酶联生物

规    格：96T/48T

分    类：小鼠ELISA检测试剂盒

价    格：询价

特    点：灵敏【mǐn】性高、特异性强【qiáng】、重复性好【hǎo】

运输方面：现货供应

保存温度：低温保存

实验前注意：

1、保证充分的孵育时间和温度。

2、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

3、在混合或溶解蛋白溶液时，避免泡沫产生。

4、在实验开始之前，安排好实验流程。

5、在实验开始之前，清洁工作台。

6、检【jiǎn】查不稳定或者变质的试剂溶液（比如沉淀【diàn】或变色），有些试剂，比如标准【zhǔn】品稀释【shì】液或者检 测稀释【shì】液【yè】，可【kě】能在【zài】设计时就含有沉淀物。

7、所【suǒ】有试剂在滴【dī】入酶标板之前，必需充【chōng】分混匀，而由 于沉【chén】淀物的【de】特性，在加入酶标【biāo】板之前，必需不停【tíng】搅拌。

操作详情：

1、使用【yòng】前，将所有【yǒu】试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫，以免【miǎn】加【jiā】样【yàng】时加入大量的气泡，产生【shēng】加【jiā】样上的误差。

2、根据待【dài】测【cè】样品数量加上标准品的【de】数【shù】量【liàng】决【jué】定所需的板条数，每【měi】个标准【zhǔn】品和空白孔建议做复孔【kǒng】，每【měi】个样品根据【jù】自己的数量来【lái】定，能使用复孔的尽量做【zuò】复孔。

3、加【jiā】入稀释好后的【de】标准品50ul于反应孔、加【jiā】入待测样品50ul于【yú】反【fǎn】应孔内，立【lì】即加【jiā】入50ul的【de】生物-素标记【jì】的抗体，盖【gài】上【shàng】膜板，轻【qīng】轻振荡混匀，37℃温育45分钟。

4、甩【shuǎi】去【qù】孔内液体【tǐ】，每孔【kǒng】加满洗涤【dí】液，振荡30秒【miǎo】，甩去洗涤液，用吸水纸拍干，重复此操作【zuò】4次，如果用洗板机洗【xǐ】涤，洗涤【dí】次【cì】数增加一次【cì】。

5、每孔【kǒng】加入【rù】100ul的亲和链酶【méi】素【sù】-HRP，轻轻【qīng】振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

6、甩去【qù】孔【kǒng】内液体，每孔加【jiā】满洗涤液，振荡30秒，甩【shuǎi】去洗涤液【yè】，用吸水纸拍干，重复此操【cāo】作4次，如果用洗板机【jī】洗【xǐ】涤，洗【xǐ】涤次数增加【jiā】一次【cì】。

7、每【měi】孔【kǒng】加入底物A、B各50ul，轻轻振【zhèn】荡混匀【yún】，37℃温育5分钟，避【bì】免光【guāng】照。

8、取出酶标板，迅速加入50ul终止【zhǐ】液【yè】，加入【rù】终止液后应立即【jí】测【cè】定结果。

9.在933nm波长处测定各孔的OD值。

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