产品时间:2024-9-23
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产品名称:小鼠磷酸化蛋白激酶C ELISA检测试剂盒
品 牌:酶联生物
规 格:96T/48T
分 类:小鼠ELISA检测试剂盒
价 格:询价
特 点:灵敏性【xìng】高、特【tè】异性【xìng】强、重复性好【hǎo】
运输方面:现货供应
保存温度:低温保存
实验前注意:
1、保证充分的孵育时间和温度。
2、切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。
3、在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。
4、在实验开始之前,安排好实验流程。
5、在实验开始之前,清洁工作台。
6、检查不【bú】稳定或者变质的试剂溶液(比如沉【chén】淀【diàn】或变色),有些试剂,比如标【biāo】准【zhǔn】品稀释液或者检 测稀释【shì】液【yè】,可能在【zài】设计时就含有沉淀【diàn】物。
7、所有试剂在滴入酶标板之前【qián】,必【bì】需充分混匀【yún】,而由 于【yú】沉淀物的特性,在【zài】加入酶标【biāo】板之前,必【bì】需不停搅【jiǎo】拌。
操作详情:
1、使用前,将所有【yǒu】试剂充分【fèn】混【hún】匀,不【bú】要使液体产生大量的泡沫【mò】,以免加样时【shí】加入大量的气泡,产生加【jiā】样上【shàng】的误差。
2、根据待测【cè】样【yàng】品数量加上标【biāo】准品的【de】数量决定所【suǒ】需【xū】的板条数,每个标准【zhǔn】品和【hé】空【kōng】白孔建议做复孔,每个样品根据自己的【de】数量来定,能使用复【fù】孔的尽量做复【fù】孔。
3、加入【rù】稀释好后的标准品50ul于反【fǎn】应孔、加【jiā】入【rù】待测样【yàng】品50ul于反【fǎn】应孔内,立即加【jiā】入50ul的【de】生物-素【sù】标记的抗体【tǐ】,盖上膜板,轻轻振荡【dàng】混匀,37℃温育【yù】45分钟。
4、甩去【qù】孔内【nèi】液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍【pāi】干【gàn】,重复此操【cāo】作【zuò】4次【cì】,如果用洗板机【jī】洗涤,洗涤次数增加【jiā】一次。
5、每孔加入100ul的亲【qīn】和【hé】链酶素-HRP,轻轻振荡【dàng】混匀,37℃温育【yù】30分钟。
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡【dàng】30秒,甩去【qù】洗涤【dí】液【yè】,用吸水纸拍干,重复此【cǐ】操【cāo】作4次【cì】,如【rú】果用洗板机洗涤,洗涤次【cì】数增加一【yī】次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡【dàng】混匀,37℃温【wēn】育【yù】5分钟,避免光照【zhào】。
8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加【jiā】入终止【zhǐ】液【yè】后应【yīng】立即测定结果【guǒ】。
9.在933nm波长处测定各孔的OD值。
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