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上海酶联ELISA实验通用规则
更新时【shí】间:2024-9-21   点击【jī】次数【shù】:232次

ELISA实验通用规则

1、要保证移液枪的准【zhǔn】确性,误差不能超过2%。可【kě】用水和电【diàn】子天【tiān】平进行确定。但最【zuì】好有专业【yè】人员进行【háng】矫【jiǎo】正。

2、要配备【bèi】20ul、50ul、100ul、1000ul和排【pái】枪【qiāng】各一支。吸取不同的液体后,要更【gèng】换枪头【tóu】。即使是吸取标准【zhǔn】品时。

3、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

4、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

5、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,没有洗板机【jī】时,倒去【qù】液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上【shàng】用力【lì】拍干。

6、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加【jiā】入【rù】1/1000的叠氮钠后可长期保存【cún】。

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7、要在实验前1小时将【jiāng】试剂盒从冰箱中【zhōng】取出,使各种试剂都恢复到室【shì】温【wēn】,以【yǐ】使结果更稳定【dìng】。

8、实验时,要使底物避光保存。

9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

10、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

11、将【jiāng】液体加到酶标孔中时,避免枪头【tóu】和孔内液体接【jiē】触,可使枪头上的【de】液滴和孔【kǒng】壁接触,液滴会【huì】自【zì】然流下【xià】去。

ELISA试剂盒实验中需留心下列的细节:

1. 严格按照规定的时刻和温【wēn】度进行温育以保证【zhèng】成果【guǒ】。一【yī】切试剂都必须【xū】在运用前【qián】到达室温9-21℃。运【yùn】用后当【dāng】即冷藏保存【cún】试剂。

2. 洗板不正【zhèng】确能够导致【zhì】不的【de】成果。在加【jiā】入底物前确【què】保尽量【liàng】吸干孔内液体【tǐ】。温育【yù】过程中不要让微孔枯燥【zào】掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应【yīng】呈无色或很【hěn】浅的【de】色【sè】彩【cǎi】,现已变蓝的底物液【yè】不能运用。

5. 防止试剂和标本的穿插污染以免形成错误成果。

6. 在储存和温育时防止强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任【rèn】何反响试剂【jì】不【bú】能触摸漂白【bái】溶剂或漂白溶剂所散发【fā】的强烈气体。任何漂白【bái】成分都会损【sǔn】坏试剂盒中【zhōng】反响试剂的【de】生物活性。

9. 不能运用过期产品。

10. 假如【rú】可能传【chuán】播疾病,一切【qiē】的样品都应管理好,按照规【guī】定的程序处理样【yàng】品和【hé】检测设备。

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