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小鼠ELISA试剂盒夹心法操作注意事项
更新【xīn】时【shí】间:2024-9-21   点击次数:519次

做【zuò】小鼠ELISA试剂盒实验,有几种【zhǒng】常见的实验方【fāng】法,他们分别是【shì】竞争法、捕【bǔ】获法、间接法、夹心法、而夹心【xīn】法又【yòu】可以分为【wéi】双抗【kàng】体夹【jiá】心法和双抗原【yuán】夹心法【fǎ】!在今天【tiān】的文章中,将详细得跟【gēn】大家讲述双抗体夹【jiá】心法【fǎ】!双抗体夹【jiá】心法,其基【jī】本原【yuán】理是将一定量的包被抗体以物【wù】理吸附的方法固定【dìng】于聚苯乙烯微孔【kǒng】板表面,加【jiā】入无关【guān】蛋白载体【tǐ】封闭未结合位点,小鼠ELISA试剂盒然后加入【rù】待检【jiǎn】标本,通【tōng】过【guò】加入检测【cè】抗体,酶【méi】标记第二抗体后用TMB底物显色,微孔板【bǎn】中颜色【sè】的深浅与待测物【wù】的【de】浓度呈正相关。

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该小鼠ELISA试剂盒方法的【de】适用条件是:含有多【duō】个【gè】抗原【yuán】表【biǎo】位【wèi】的大分【fèn】子物质。因为这【zhè】种检测方法需要两种抗体,所【suǒ】以【yǐ】就【jiù】涉及抗体配对的【de】问题。一般而言【yán】,常用的抗体配对方法【fǎ】有【yǒu】一下几种:包【bāo】被抗体为单抗【kàng】,检【jiǎn】测抗体为多抗;包被抗体为单【dān】抗【kàng】,检测抗体【tǐ】为单抗,但这两【liǎng】种单抗针【zhēn】对的抗原表【biǎo】位不同;包被抗体为多抗,检测抗体为多抗,这两种【zhǒng】多抗【kàng】一般是来源【yuán】于【yú】不同的宿主。

      这种检【jiǎn】测方【fāng】法【fǎ】在应用酶标【biāo】第二抗体时,应该注意的一个原则是:第二抗体必须只能针对检测抗体,而不能针对【duì】包被抗体【tǐ】。鉴于酶标二【èr】抗的局限性,现在一般厂家【jiā】都引入亲和【hé】素放大系统【tǒng】,这种【zhǒng】系【xì】统【tǒng】在提高【gāo】反应灵敏度【dù】的同【tóng】时,应用起来也【yě】更加方便【biàn】,我们只需要对检测抗体【tǐ】进行标记,小鼠ELISA试剂盒【hé】不需要【yào】对【duì】每一种不同【tóng】来【lái】源的二抗进【jìn】行酶标记,只需对亲【qīn】和素【sù】做【zuò】HRP标记就可【kě】以省去很多繁琐【suǒ】的工【gōng】作。

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