酶联生物小鼠1型胶原(COL1)ELISA试剂盒详情介绍

常见问题以及解决方法：

1、试剂的选【xuǎn】择：选择优【yōu】良试剂大家都【dōu】是【shì】知道的【de】，但是在检测之【zhī】前还应【yīng】该提前半个小时将试剂拿【ná】到【dào】常温下进行解冻

2、加样【yàng】中可能遇到的问题【tí】：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰【pèng】到血清血浆【jiāng】不好分【fèn】离的情况，这个时候的解【jiě】决办【bàn】法是【shì】先【xiān】放在常温中1到2小时，然【rán】后【hòu】在【zài】进【jìn】行离心处理

3、洗板【bǎn】时容易造【zào】成误差【chà】： 因为洗板是人工洗的，所以【yǐ】判断什么时【shí】候洗干净了也是人为判【pàn】断的，这个时【shí】候带有【yǒu】主观【guān】色【sè】彩，所以【yǐ】多清洗几次，还有就是在洗的【de】时候孔与孔之间的液体容易【yì】交【jiāo】叉流动【dòng】

4、显色问题： 使用了过期的显色剂或【huò】者是显【xiǎn】色剂用过后【hòu】放置时间太【tài】长，都有可能造【zào】成显色【sè】剂不【bú】显色。所以在进行【háng】显色反应的【de】时候【hòu】，要先查看显色剂【jì】本身的【de】情况

5、终止反应：在加终止【zhǐ】剂【jì】的时候由于倾倒【dǎo】速度快，差生气泡，造【zào】成假阳性【xìng】结果。所【suǒ】以在倒终止剂的【de】时候要缓慢【màn】倒【dǎo】

6、读板：读板的时候先应该保证板的清洁干净

7、严格按照说明书操作

实验操作中注意事项总结如下

（1）要注意避免出现【xiàn】严重溶血【xuè】。血红蛋白中含有血红素【sù】基【jī】团【tuán】，其有类似过氧化【huà】物的活性【xìng】，因此，在以HRP为标记【jì】酶的ELISA试剂【jì】盒测定中，如血清【qīng】标【biāo】本中血红蛋白浓【nóng】度较【jiào】高，则其就很容易在温育过程中吸【xī】附于【yú】固相【xiàng】，从而与后面加入的HRP底物反应【yīng】显色【sè】。

（2）样本【běn】的采集及【jí】血清分离中要注意尽量避免细菌污染【rǎn】，一则细菌【jun1】的生长，其所【suǒ】分泌的一些酶可【kě】能会对抗原【yuán】抗体等蛋白【bái】产生分解作用；二则一【yī】些细菌的内【nèi】源性酶如大【dà】肠杆菌的β-半【bàn】乳糖【táng】苷【gān】酶本【běn】身会对用相应酶作标记的测定方法产生【shēng】非特异性干扰【rǎo】。

（3）血清标本如是以无菌【jun1】操作【zuò】分离【lí】，则可以在2～8℃下保存【cún】一周，如为有菌操【cāo】作，则建议冰冻保【bǎo】存。样本的长时间保存，应【yīng】在【zài】-70℃以【yǐ】下【xià】。

（4）冰冻【dòng】保存的血【xuè】清【qīng】标【biāo】本须【xū】注【zhù】意避免因【yīn】停电等造【zào】成的反复冻融。ELISA试剂盒标本的反复冻融所产生的机械【xiè】剪切力将对【duì】标本中的蛋白【bái】等【děng】分【fèn】子产生破坏作用【yòng】，从【cóng】而引起假阴【yīn】性结果。此外，冻融标本【běn】的混匀亦应注意，不要【yào】进行剧【jù】烈振荡，反复颠倒混匀即可。

试【shì】剂盒内【nèi】酶标条可拆卸【xiè】，按【àn】实验【yàn】需求可【kě】分多次使【shǐ】用【yòng】；使用后的【de】剩余试剂盒建议在首-次实验后 1个月内使用【yòng】完毕。产品过期【qī】时间以盒子上的标【biāo】签为准，保质期内所有组分都【dōu】确保是稳定【dìng】的。

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