小鼠ELISA试剂盒采用【yòng】双抗体【tǐ】一步夹心法酶联免疫【yì】吸【xī】附试验,往预先包【bāo】被仓鼠组织蛋【dàn】白酶捕获抗体的包【bāo】被微孔中【zhōng】,依次加入标【biāo】本、标准【zhǔn】品、HRP标记的【de】检测抗体【tǐ】,经过温育并洗涤。用底物【wù】显色,TMB在过氧化物酶的催【cuī】化下转化成蓝色,并【bìng】在酸【suān】的作用【yòng】下转化成。颜色【sè】的深浅和样【yàng】品【pǐn】中的仓【cāng】鼠组织蛋白酶呈正相【xiàng】关,用酶标仪在【zài】450nm波长下测【cè】定吸光度,计【jì】算样品浓度。
小鼠ELISA试剂盒的注意事项:
1.使用【yòng】前请保存在9-21℃。复溶后的标准【zhǔn】品若未用【yòng】完【wán】,请废弃。
2.微量试剂运【yùn】输【shū】中颠簸和可【kě】能的倒置,会使液体沾到管壁【bì】或【huò】瓶盖。因此使用前请1000转/分离心【xīn】1分钟,以【yǐ】使附【fù】着管壁或瓶盖的液体【tǐ】沉积【jī】到管底。
3.从冰箱中取出的【de】浓缩洗涤液可能【néng】有【yǒu】结晶,属于正常现象,微加热【rè】至40℃使结晶【jīng】溶解后再【zài】配制洗涤液。(加热【rè】温度不要超过50℃)使【shǐ】用【yòng】时洗【xǐ】涤【dí】液应为室温。
4.不同批号的试剂盒组份避免混用(洗涤液和反应终止液除外)。
5.充分轻微混匀对反应结果尤为重要,好使【shǐ】用【yòng】微【wēi】量【liàng】振荡器(使用zui低频率【lǜ】),如无微量【liàng】振荡【dàng】器【qì】,可在反【fǎn】应孵育前手工轻轻混【hún】匀。
6.在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7.试验中所用的试【shì】管和吸头【tóu】均为【wéi】一次性使用,严禁在【zài】不同【tóng】的液体之间混用【yòng】!否则将影响【xiǎng】试验【yàn】结果。
8.试【shì】验【yàn】中请穿着试验服并带乳【rǔ】胶手套做好防护【hù】工【gōng】作【zuò】。特别是【shì】检测【cè】血液或【huò】者其他体液标本时【shí】,请按国家生物试验室安全防护条列【liè】执行。