ELISA试剂盒实验看似简单，其实不然。记得以【yǐ】前一个同学*次做【zuò】ELISA实验【yàn】，跟我说，ELISA实验【yàn】简直太简单【dān】了【le】，到【dào】第2次在【zài】次做ELISA实验的时候，他惊讶【yà】了，说结果差【chà】别怎么这么大（同一【yī】份标本【běn】），第三次的时【shí】候【hòu】，他决定认真【zhēn】的做一次，争取做到同一份标本，这次【cì】让他【tā】感受【shòu】到【dào】ELISA并不是那么简单，发觉其实【shí】挺难的。今【jīn】天的文章中为大【dà】家讲述一【yī】些ELISA实验中的小【xiǎo】技【jì】巧，希望对大家【jiā】有所【suǒ】帮【bāng】助！

1.操作【zuò】前应对实【shí】验的物理参【cān】数有【yǒu】充分的了解，如环境温度【dù】(保持【chí】在18C～25℃)、反【fǎn】应孵育温度和孵【fū】育时间、洗涤的次数等，要先查【chá】看水【shuǐ】育箱温度，ELISA试剂盒是【shì】否符【fú】合要求。

2.正【zhèng】确使用加样器加样器应垂直加入标本或【huò】试剂，避【bì】免刮【guā】擦包【bāo】被【bèi】板底【dǐ】部。加样【yàng】过程中避免液体外溅，血清残留【liú】在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干【gàn】净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致【zhì】结果错【cuò】误，实【shí】验重复性差【chà】。

3.手工洗板加洗【xǐ】液时冲【chōng】击力不要太【tài】大【dà】，洗涤【dí】次【cì】数不要超过【guò】说明书推荐【jiàn】的洗涤次数【shù】，洗液在反应孑L内【nèi】滞留的时间【jiān】不宜太【tài】长。不要使洗液在孑L间窜【cuàn】流【liú】，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。

4.要保【bǎo】证加液量一致ELISA试剂盒【hé】我们【men】在使用时感觉滴【dī】瓶加液不如加样器好，滴瓶【píng】不易控制【zhì】加【jiā】液量【liàng】不准，造【zào】成显色不统一，判断【duàn】错误。

5.显色液量不可过多加样的工作环境不【bú】能处于阳光直射的环境【jìng】下，加显色【sè】系统后要避光【guāng】反应，显【xiǎn】色液【yè】量不能【néng】过多，以免显色【sè】过【guò】强【qiáng】。

ELISA试剂盒的影响因素应选用【yòng】有国家批准【zhǔn】文号，质量靠得【dé】住的产【chǎn】品，不【bú】能图便宜，忽视质量【liàng】保证。试剂【jì】应妥善【shàn】保存于【yú】4℃冰箱内，在【zài】使用时先平衡至室温【wēn】，不同批号【hào】的试剂组分不宜【yí】交叉使【shǐ】用【yòng】。试剂【jì】开启后要在【zài】一【yī】周【zhōu】内用完，剩余的试剂下次用时应先检查是【shì】否变质，显色剂如被【bèi】污染变【biàn】色将造成全部显色，导致错【cuò】误结果。