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上海酶联生物如何正确选择ELISA试剂盒
更【gèng】新时间:2024-9-22   点【diǎn】击次数:911次


ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特【tè】点在【zài】实验中得到了广泛应【yīng】用,然而新手们面对各种各样【yàng】、动则上千种的ELISA试剂盒,内心【xīn】应【yīng】该【gāi】是【shì】崩【bēng】溃的。各种厂家【jiā】、品牌,各【gè】种种属【shǔ】,各种参数,琳琅【láng】满目【mù】,质量良莠不齐,如何【hé】浪里淘金,选择【zé】既符合研究需求,又品【pǐn】质【zhì】上【shàng】乘的 ELISA 试剂盒呢?今天教教大家【jiā】如【rú】何正确找到合适【shì】的【de】ELISA试剂盒。

1.要明确样本类型

不同厂家验证【zhèng】样本类型不同,即使同一【yī】厂家【jiā】不同试剂【jì】盒,其验【yàn】证【zhèng】样本类型也不尽相同。特【tè】别【bié】是【shì】复杂的血浆样本,根据样本处【chù】理方式【shì】的差异,分为 EDTA 血浆【jiāng】、肝素抗凝【níng】血浆和柠檬酸盐【yán】血浆,因此购买【mǎi】前需仔细核对。

2.要会预测自己的目标因子的浓度

一【yī】般来说,待测因子可以根据经验或资料获【huò】得参考的检测【cè】范围【wéi】,且正常人与疾【jí】病状态存在差异【yì】。如热门【mén】炎症因子 IL-6,正常【cháng】人血清中浓度为【wéi】 3.13 pg/mL,病人【rén】会【huì】显【xiǎn】著增高,CAR-T 回输病【bìng】人血清中的【de】 IL-6 浓度甚至为正常人的 200 倍以上【shàng】。因而,必【bì】要时【shí】进行样本的稀释及【jí】选【xuǎn】择合适【shì】检【jiǎn】测范围的试剂盒极其【qí】重要。若浓度太低,可选择高敏试剂【jì】盒;若【ruò】不确定待测【cè】浓度或【huò】样本间【jiān】浓度【dù】差异较大,建【jiàn】议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒【hé】,各类【lèi】型检测范围差异较【jiào】大,需【xū】要根据实际情况选择合适的【de】试剂盒【hé】。

3.检查试剂盒进行过哪些质控

质控数据在说明书中【zhōng】即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过【guò】严格的【de】质控实【shí】验,包【bāo】括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释【shì】实验及交【jiāo】叉反【fǎn】应测试【shì】等,每个数据好【hǎo】都看一下【xià】,确【què】保结果重现性及准确性。

4.确定需检测的因子数量

如果待测因子超过 5 个【gè】,且样本【běn】量较小时,单因子 ELISA 检【jiǎn】测【cè】方【fāng】法并不是。建议【yì】考虑多因子【zǐ】检测方法,如固相芯片(样本【běn】数量一般 5 个以内,检【jiǎn】测指标可达上百个)及 Luminex 液【yè】相芯片方法(检测样本多达 80 个,检测指标多【duō】达 50 个【gè】)或【huò】微流控【kòng】 ELISA 检【jiǎn】测系统 Ella。可【kě】节【jiē】约样【yàng】本及时间成本,也可保证【zhèng】检【jiǎn】测结果准确【què】。

5.预算评估

预算往【wǎng】往是大家优先考虑的,实【shí】际上,不能够一味讲【jiǎng】究产【chǎn】品【pǐn】价格,更需【xū】要考虑性价比。生物学是极其严谨【jǐn】的科学【xué】,一致性的实验结果是基【jī】金、文章等评【píng】审【shěn】过程中【zhōng】的因素,即使低【dī】廉的价格,不能【néng】够重现结果,也是资源的另一种浪费。


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