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上海酶联生物细胞培养需要哪些环境因素
更新时【shí】间:2024-9-22   点击次数:820次

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1.无菌环境

无【wú】毒和【hé】无【wú】菌是体外培养细胞【bāo】的【de】首要条件。细胞在活体内,解【jiě】毒系统和免疫【yì】系统可抵【dǐ】抗微生物或其【qí】他有害物质的入侵,但细胞在体外培养的【de】过【guò】程中,缺乏机体免疫系统【tǒng】的保【bǎo】护而丧失对微【wēi】生物的防【fáng】御能力和对有害物质的解毒能【néng】力【lì】。为保证细【xì】胞【bāo】能在【zài】体外【wài】环境中生长繁殖,必须【xū】要确保【bǎo】无菌工作区域、良好【hǎo】的个人卫生、无菌试剂和培养基以【yǐ】及【jí】无菌操作。

常见的【de】微生【shēng】物污染有支原体、细【xì】菌、真菌。支原【yuán】体无致死【sǐ】毒【dú】性,可与细胞长期共存【cún】,对【duì】细胞有潜在影响,但体【tǐ】积小,不易鉴别,可借助于地衣【yī】红或Hoechst33342染色来进【jìn】行【háng】检测。细菌【jun1】增【zēng】殖快,在短时【shí】间内即可大量扩增,并【bìng】产生毒素杀死【sǐ】细胞。真菌的种【zhǒng】类繁多,肉眼可见【jiàn】,漂浮于培养液面上,可呈丝【sī】状、管状或树枝状等。

2.合适的温度

一【yī】般哺乳类与禽类细胞【bāo】在体【tǐ】外培养的【de】适宜温度是37~38℃,不【bú】适宜【yí】的【de】环境温度【dù】会影响细【xì】胞【bāo】的生长。细胞对低【dī】温的耐受【shòu】能力要强于【yú】对高温的耐【nài】受能力,在低【dī】温下【xià】,细胞的【de】代谢活力及核【hé】分裂能力【lì】降低。若【ruò】温度不低于0℃,虽然细胞代【dài】谢受【shòu】到影响,但无损伤作用;25~35℃时,细胞以缓慢的速度生长;但若被置于40℃数小【xiǎo】时,则不仅不【bú】利于细胞生存、生【shēng】长,甚至可导【dǎo】致其死亡。

3.气体环境与pH

细胞的体外【wài】培养需要理想的气体环【huán】境【jìng】,氧气、二【èr】氧【yǎng】化碳是细【xì】胞生存的必要条【tiáo】件。氧气参与【yǔ】细胞的三【sān】羧【suō】酸循环【huán】,为细胞生存、代谢【xiè】与合成【chéng】提供能量;二氧化碳既是细胞的【de】代谢产物,是【shì】细胞生【shēng】长的必需成分,又与维持培【péi】养液的pH有【yǒu】关。大【dà】多数细胞适宜的pH范围【wéi】往往【wǎng】是7.2~7.4。在开【kāi】放式培养中,以5%的二氧化碳气体比例【lì】为【wéi】宜。 

4.适宜的渗透压

高渗溶液或低渗溶【róng】液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂【liè】。因此,渗【shèn】透压是体外培养细胞的【de】重【chóng】要条件之一【yī】。多数体外培【péi】养的细胞对【duì】渗透压都有一【yī】定【dìng】的耐【nài】受能【néng】力,实【shí】际应用【yòng】中,260~320mmol/L的渗【shèn】透【tòu】压可适用【yòng】于大多数细胞。


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