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欢迎体验ELISA试剂盒新版,三月好发展
更新时间【jiān】:2024-9-22   点击次【cì】数:925次【cì】

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目前,分子【zǐ】生物学正【zhèng】在并【bìng】终【zhōng】肯【kěn】定会【huì】让我【wǒ】们对整【zhěng】个生命科学有一个全面而【ér】*的认识,其对免疫测定技术【shù】发展的影响【xiǎng】也是直【zhí】接【jiē】而又有【yǒu】效【xiào】的,它使我们对以前一些难以检测的生物活【huó】性物质的测定变得轻而易举,并【bìng】且大【dà】大提高了检【jiǎn】测的【de】灵敏度和特异性。

较早用于免疫测定的基因工程抗原是【shì】HBcAg和HBsAg,这两种基【jī】因工程抗原的【de】出【chū】现,较好【hǎo】地解决了抗【kàng】HBc和HBe的测定问题。因为要从【cóng】病毒本身去大【dà】量获取这两【liǎng】种纯抗原较为困难【nán】,并且这【zhè】一点对【duì】于难培【péi】养的病原微生【shēng】物来说,如HIV、HCV和梅【méi】毒螺旋体等都有些【xiē】共性【xìng】。

 一、ELISA 

  HCV目前尚不能体【tǐ】外培养【yǎng】,只能用基因【yīn】工【gōng】程或【huò】化学【xué】合成方法获取HCV结构和非结构【gòu】区的各【gè】种抗原片断,已知HCV基因组有7个功能【néng】区【qū】组成:核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5(有分为NS5a和NS5b)区,合成抗原的优点是易于【yú】纯化,特异性好,抗原抗【kàng】体反应【yīng】强。

二、代抗HCV-ELISA

由【yóu】美国ortho公司克隆C1003抗【kàng】原几个片断与人超氧化物【wù】歧【qí】化酶【méi】(SOD)结【jié】合。用酵母从病毒基因【yīn】组非结【jié】合【hé】区得到表达,表达为融合蛋白,亦作【zuò】为包被固相载体【tǐ】。

抗【kàng】原组合【hé】:NS4 区二【èr】个基因片断为NS 9-22-1和【hé】C1003

特性【xìng】:IgG抗【kàng】C100在发病【bìng】后数月后,才检出,故不宜作早期诊断。

约由20%的病人不出现抗体。IgM抗-C100急【jí】性期检【jiǎn】出【chū】率只有64%。

C100的抗【kàng】原性较弱,在【zài】HCV复制中,不能充分【fèn】暴【bào】露宿【xiǔ】主的免疫系统。

特异性和灵敏性较差。

三、第二代HCV-ELISA试剂盒

 用基因重组的HCV结【jié】构蛋白【bái】与【yǔ】非结构蛋白【bái】抗原包被固相载体。

抗原组合【hé】:核心【xīn】区【qū】(C区)多肽【tài】C22  NS区多肽C33  C1003和NS 9-22-1

增加C22区和C33区【qū】后,抗体出现早,有助早期诊断,提高阳【yáng】性率【lǜ】。有利【lì】早【zǎo】期诊断【duàn】。

C22是早期易出现病毒血症

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四、第四代HCV-ELISA 试剂盒

美国新近【jìn】推出【chū】一种包括【kuò】HCV基因组7个功能区所有免疫决定基的单一【yī】融合蛋白,称为【wéi】多决【jué】定基【jī】融合抗【kàng】原【yuán】,采用表面活【huó】性剂【jì】处【chù】理分界病【bìng】毒表面复合【hé】物,释【shì】放HCV核【hé】心抗原      (core)并用ELISA法,灵敏度可达500拷贝/ml,已接近【jìn】核酸扩增检测水平。

 抗【kàng】原组【zǔ】合:以Core和【hé】NS3作为主要检测片断(比例【lì】十分重要)加合成多肽NS4

 特点:

① 直接测Core抗原;

②不易发生变异;

③ 抗IgM 和IgG检出率可达100%;

④ 特异性达99。8%灵敏度为100%。

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