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保证ELISA试剂盒实验结果的几大基础
更新时【shí】间【jiān】:2024-9-22   点击次数:738次【cì】

根据前面说到的ELISA试剂盒质量控【kòng】制中我们知道【dào】,由【yóu】ELISA的性质和来源,分为可测误差、随机误差、人为误差【chà】。在【zài】ELISA试剂盒实验中【zhōng】,只有【yǒu】遵循它应【yīng】有的规则才能更【gèng】好的完成【chéng】实验,对此
上海酶联生物特别为您分析了保证实验结果的几大基础:

1.要在实【shí】验前1小时【shí】将试剂盒从【cóng】冰箱中取【qǔ】出,使【shǐ】各种试剂都恢【huī】复到室温,以使结果更稳定。

2.实验时,要使底物避光保存。

3.用枪吸【xī】取液体时速【sù】度【dù】不能太快,以免产生气泡而使吸取【qǔ】量不准【zhǔn】确。

4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

5.要保证移【yí】液枪的【de】准【zhǔn】确性,误差不能超过【guò】2%。可用水和电子天平【píng】进行确【què】定。但有专业人【rén】员进行矫正。

6.要配备【bèi】20ul、50ul、100ul、1000ul和排【pái】枪各一【yī】支。吸【xī】取不同的液体【tǐ】后,要更换枪头。即使【shǐ】是吸取标准品【pǐn】时。

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再加【jiā】入酶【méi】标记的抗原【yuán】或抗【kàng】体,也通过反应而结【jié】合在固相载体上。此时固相上的【de】酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例【lì】。加入酶反应的底【dǐ】物后【hòu】,底物被酶催化成【chéng】为【wéi】有色产物,产物【wù】的量与标本【běn】中受检物质的量【liàng】直【zhí】接相关,故可根据呈色的深【shēn】浅进行【háng】定性或定【dìng】量【liàng】分析。
在操作步骤中,还有这几个必知项目:

1. 温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

2. 将液体加【jiā】到酶标孔中【zhōng】时,避免【miǎn】枪【qiāng】头和孔内【nèi】液【yè】体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴【dī】会自然流下去【qù】。

3. 洗【xǐ】板时,每次洗液加入后【hòu】,应静置1分钟,使清【qīng】洗更加*。没有洗板【bǎn】机时【shí】,倒【dǎo】去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸【zhǐ】上【shàng】用力拍干。

4. 洗液不【bú】够时,可【kě】用【yòng】蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲【chōng】液,加入0.1%的吐温6作【zuò】为洗液。加入1/1000的【de】叠氮钠后可长【zhǎng】期保存。

5. ELISA试剂盒【hé】实验【yàn】中,液体全部加【jiā】完【wán】后,可将酶标板【bǎn】在桌【zhuō】子上平行轻轻晃动30秒,混【hún】匀液体。也可【kě】以用酶【méi】标仪的晃动功能【néng】。

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