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哪些原因会导致ELISA试剂盒变质
更【gèng】新【xīn】时间:2024-9-22   点击次数:1039次【cì】
  我们【men】在ELISA实【shí】验中经常会【huì】碰到试剂盒变质的问题,那么【me】是什【shí】么原因导致了ELISA试剂盒质保呢?一旦变质对我们的实验又会有什么影响呢?
 
  导致ELISA试剂盒变质的原因主要分为七种:
 
  1、方法学的影响
 
  ELISA测定模式包括以【yǐ】下几种:双抗体夹心【xīn】法、间【jiān】接【jiē】法、双【shuāng】抗原夹心【xīn】法【fǎ】、IgM抗体捕捉法【fǎ】、竞【jìng】争抑制法,其中竞争抑制【zhì】法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操【cāo】作时差所引起【qǐ】的bu公平竞争等【děng】因素的影【yǐng】响,结果重【chóng】复性较差,质量较【jiào】难控制。
 
  2、试剂因素
 
  不同批【pī】次的ELISA试剂在制【zhì】作过程中很难保证质量【liàng】*一致【zhì】,即使是通过【guò】批批【pī】检【jiǎn】的项【xiàng】目其检测结果也存在差异,因此必须选择和订购长批号的试剂,并保证保存条【tiáo】件【jiàn】。 严格执行这一【yī】标准【zhǔn】可以避免因【yīn】试【shì】剂批号改变而【ér】重新建立质控体系及重【chóng】新评【píng】估【gū】试剂的复【fù】杂过【guò】程【chéng】,并且能够保证结果【guǒ】的【de】稳定性;对于效期短【duǎn】、使【shǐ】用率低的试剂,应当小量分装,每次使用则【zé】取分装【zhuāng】部分即可【kě】,避免反复冻【dòng】融造成试剂【jì】的失效【xiào】。
 
ELISA试剂盒
       3、样本因【yīn】素【sù】
 
  标【biāo】本干扰因【yīn】素包括内源性干【gàn】扰因【yīn】素和外源性干扰【rǎo】因素,前者【zhě】包括类风湿因子、补体、异嗜【shì】性抗体、自身抗体、溶菌酶等【děng】,后者【zhě】包括标本溶【róng】血、标本被细菌污染、标本贮存时间过【guò】长、标本凝固【gù】不全、冷【lěng】冻标本的反复【fù】冻融等。
 
  4、操作因素
 
  ELISA操作步骤复杂【zá】,操作不当将引起【qǐ】较大的误差。加样、温育、洗涤【dí】、显色、比色。
 
  5、灰区的设置
 
  通常情况下,ELISA定【dìng】性实验以“阳性”和“阴【yīn】性【xìng】”来报告结【jié】果,两者【zhě】间有一条【tiáo】分界【jiè】线被称为“阳性判断值”(cut-off value,CO值),这是定性免【miǎn】疫测定【dìng】结果【guǒ】报告的依据。
 
  6、标本复查
 
  ELISA手工检测过【guò】程复杂,影响【xiǎng】因素较【jiào】多,即使室内质控在控,也【yě】可【kě】能因孔间差异【yì】而造成结果的差异,因此加大【dà】复【fù】查力度是【shì】保证结果准确性的【de】可【kě】靠方法【fǎ】,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模【mó】式【shì】的检【jiǎn】测结果进【jìn】行复【fù】查。
 
  7、常表示结果的常用方法
 
  ⑴.定性测定。
 
  ⑵.半定量测定 结果一般以滴度表示。
 
  ⑶.定【dìng】量测定 即用已知量【liàng】的标准品作一系【xì】列【liè】稀释后进【jìn】行ELISA测定,绘制标准曲线,结果【guǒ】以量或单位【wèi】表示【shì】。在ELISA定量【liàng】检【jiǎn】测中每一块反应板都【dōu】必须绘制相应的标准曲【qǔ】线。
 
  只要我们注意以上七种情况,ELISA试剂盒变质的原因就基本上也不会【huì】存在了,如果你还有其他【tā】关于ELISA试【shì】剂盒方【fāng】面的疑问【wèn】欢迎随时咨【zī】询我【wǒ】们的客服【fú】人员。
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