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关于细胞培育这几点必定要注意了
更【gèng】新【xīn】时间:2024-9-22   点击次数:1306次

细胞培育技能又叫细【xì】胞克【kè】隆技能。细胞培育技能【néng】指的是细胞在体外条件【jiàn】下的【de】成长【zhǎng】,在培育的进程中细胞不再构【gòu】成安【ān】排(动物【wù】),今天【tiān】的文章中【zhōng】跟我们介【jiè】绍一些【xiē】关于细胞培育的基础知【zhī】识!

一、细胞培育的基本概念
 体外培育(in vitro culture)包【bāo】括所有结【jié】构【gòu】层次【cì】的培育【yù】,即:安排培育(tissue culture)、细胞培育【yù】(cell culture)和器官培育(organ culture)。
细胞培育(Cell culture)指从【cóng】生物【wù】机体取出部分安排【pái】涣散成单个细胞或直接从机【jī】体取出【chū】单个细胞,也可把体外【wài】培育细胞涣散成【chéng】单个细胞【bāo】在体外条件下【xià】培【péi】育,细【xì】胞能继【jì】续存活与【yǔ】增殖。
 
二、细胞培育意图与用处
1、科学研讨
(1)药物研【yán】讨开发,如【rú】新【xīn】药挑选,疫苗、基因工程【chéng】药物、细胞工程【chéng】药物研讨与开发、单克隆抗体制备等。
(2)基【jī】础研讨,如药物效果机理、基因功能【néng】、疾【jí】病产生机【jī】理等研【yán】讨。
2、生物制药
(1)疫苗出产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋【zī】病【bìng】疫【yì】苗等),多肽疫苗【miáo】(肿瘤疫【yì】苗【miáo】)等。
(2)基因工程药物出产:如EPO等。
(3)抗体药物、基因治疗药物出产。
(4)细胞工【gōng】程药【yào】物【wù】出【chū】产【chǎn】:生物细胞内的一【yī】些生物活【huó】性多肽,生物活性物质等。
(5)使用【yòng】细胞【bāo】法体外测定生物活【huó】性物质的活【huó】性;并【bìng】预【yù】测其在【zài】体【tǐ】内【nèi】的药效和代替体内法检测其成品的生物活性。
 
三 、原代培育和传代培育
原代培育【yù】(primary culture):将动物机【jī】体的【de】各种安排【pái】从机体中取【qǔ】出,经各种【zhǒng】酶(常用【yòng】胰蛋【dàn】白酶【méi】)、螯合【hé】剂【jì】(常用EDTA)或机械办法处理,涣【huàn】散成单细胞【bāo】,置【zhì】适宜的培育基中培育,使细胞得以生计、成长和繁衍,这一进【jìn】程称【chēng】原代【dài】培育。
 但实际上,通常【cháng】把第依代至第十代以内的培育【yù】细胞统称【chēng】为原【yuán】代细胞培育【yù】。
传【chuán】代【dài】培育(subculture):细【xì】胞在【zài】培育【yù】器皿中成长必定时刻后,被分开接种【zhǒng】到新的培育器皿中。
     当原代培育【yù】成【chéng】功今后,跟【gēn】着培育时刻的【de】延长和细胞不断割裂,一【yī】则细胞【bāo】之间互相触摸而产生触【chù】摸性【xìng】按捺,成长速度减慢甚至【zhì】中【zhōng】止【zhǐ】;另一方面也会【huì】因营养物不足和【hé】代谢【xiè】物堆集而不利于成长或产生【shēng】中毒。此时就【jiù】需要将【jiāng】培【péi】育物分割成【chéng】小的部分,重新接种到别的【de】的【de】培育器皿(瓶)内【nèi】,再进行【háng】培育。
 对【duì】单层培育而言【yán】,80%集合【hé】或刚集合的细胞是较理想的传【chuán】代阶段【duàn】。
 
四、体外培育细胞的方法
 集体培育(mass culture),将含有必定数【shù】量细胞的悬【xuán】液置【zhì】于培育【yù】瓶中,让【ràng】细胞贴壁成长,集【jí】合(confluence)后【hòu】构【gòu】成均【jun1】匀【yún】的单细胞层;
克隆培育(clonal culture),将【jiāng】高度稀释的【de】游离细胞悬【xuán】液【yè】加【jiā】入培育瓶中【zhōng】,各个【gè】细胞贴壁后,互相【xiàng】间隔较远【yuǎn】,经【jīng】过成长增【zēng】殖每一个细胞构成一个细胞【bāo】集落,称为克隆(clone)。一个细胞克隆中的所有细【xì】胞均来源于同一【yī】个祖先【xiān】细胞。

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