酶联免疫试剂盒是一种敏感性高，特异【yì】性强，重复性好【hǎo】的【de】试验【yàn】诊断办法。由于【yú】其试剂安稳、易保存，成果判别较【jiào】客观等要素，已广【guǎng】泛使用在免疫学查【chá】验的【de】各【gè】领域中。酶联免疫试【shì】剂盒在国内有许多种叫法：例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶【méi】联免疫试剂盒、酶【méi】联免疫吸【xī】附测定试剂盒、酶联【lián】免疫分析【xī】试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见【jiàn】的叫法是ELISA检测试剂盒【hé】、酶联【lián】免疫吸附【fù】测【cè】定试剂【jì】盒等。

酶联免疫【yì】试【shì】剂盒中一【yī】般【bān】有【yǒu】3次加样步聚，即加标本，加酶结【jié】合物，加底物。加样时应将所【suǒ】加物加【jiā】在【zài】ELISA试剂【jì】盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不可【kě】溅起，不可发【fā】生气泡【pào】。
 
加标本一【yī】般【bān】用【yòng】微【wēi】量加样器，按规则的量参加板【bǎn】孔中。每次加标本【běn】应更【gèng】换吸嘴，以免发生【shēng】交叉污染【rǎn】，也【yě】可用一次性的定量塑【sù】料管加样。有此测定【dìng】需用稀释的血清【qīng】，可在试管中按规则的【de】稀释度稀释后【hòu】再加【jiā】样。也可在板孔中参加稀释液，酶联免疫试剂盒再在其间参加血清标本【běn】，然后在【zài】微型震动器上震动1分钟以保证混和。加酶结合物使用【yòng】液【yè】和【hé】底物使用液时可【kě】用定【dìng】量多道加液器【qì】，使加液进程敏【mǐn】捷完成【chéng】。在ELISA检测试【shì】剂【jì】盒【hé】中一般有两次抗原抗【kàng】体反【fǎn】响【xiǎng】，即加标【biāo】本和加酶结合物后【hòu】。抗【kàng】原抗体反响【xiǎng】的完成需求有【yǒu】必定的温度和时刻，这一【yī】保【bǎo】温进程称为温育，有人称之为孵育，在【zài】ELISA中似不恰当。
 
ELISA属固相，抗原、抗体【tǐ】的结合【hé】只在固相表面【miàn】上发生。以抗体包被的夹【jiá】心法【fǎ】为例，参加板孔中的标本，其间的抗原并不【bú】是都【dōu】有【yǒu】均等【děng】的和固【gù】相抗结合的时机，只要贴【tiē】近孔壁【bì】的【de】一层溶液中【zhōng】的【de】抗原直【zhí】接与抗体触摸。这是【shì】一个逐【zhú】渐平衡的进【jìn】程，因而需经【jīng】扩散才干达到反【fǎn】响【xiǎng】的结尾。在其后参加的酶标记抗【kàng】体与固相抗原的结合也同【tóng】样如此。这就【jiù】是【shì】为什么ELISA反响总是需求必定时刻的温育【yù】。
 
温育常采用的【de】温度有43℃、37℃、室温【wēn】文4℃（冰箱温度）等。37℃是试验【yàn】室中常用的保温温【wēn】度，也是大【dà】多数抗原抗体结合的【de】合适【shì】温度。在树立【lì】ELISA办法【fǎ】作反响动力学研讨时，试验【yàn】表【biǎo】明，两【liǎng】次抗原抗体反响【xiǎng】一般在37℃经9-22小时，酶联免疫试剂盒产【chǎn】品的可【kě】达高峰。为加速反响，可提高反响的【de】温度，有些试验在43℃进行【háng】，但不宜采【cǎi】用【yòng】更高的温度。抗原抗体反响4℃更为【wéi】*，在放射【shè】免疫测定中多使反响在冰【bīng】箱【xiāng】中，以形成多的沉积。但【dàn】因所需时刻太长，在【zài】ELISA中一般不予【yǔ】采【cǎi】用。