罗布罗布芽生菌PCR检测试剂盒操作方法：

1、从【cóng】室温平衡20min后【hòu】的【de】铝箔袋中取出所需板【bǎn】条，剩余【yú】板条用自封【fēng】袋密封放回4℃。

2、设置规范品孔【kǒng】和【hé】样本【běn】孔，规范品孔各加不同浓度的规范【fàn】品50μL；

3、样本孔【kǒng】先【xiān】加待【dài】测样【yàng】本10μL，再加样【yàng】本稀释液40μL；空白孔【kǒng】不加。

4、除空白孔外，规范品孔和【hé】样本【běn】孔中每孔【kǒng】加【jiā】入辣根过【guò】氧化物酶（HRP）符【fú】号【hào】的检【jiǎn】测抗体100μL，用【yòng】封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或【huò】恒【héng】温箱温育60min。

5、弃去【qù】液【yè】体，吸水纸上拍【pāi】干，每孔【kǒng】加【jiā】满洗涤液，静置【zhì】1min，甩去洗涤液【yè】，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用【yòng】洗【xǐ】板机洗板）。

6、每孔加入底【dǐ】物A、B各50μL，37℃避光【guāng】孵【fū】育15min。

7、每孔【kǒng】加入停止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的【de】OD值。