当抗原材料中的【de】干扰物质不易除【chú】去，或不易得到足够的纯化抗【kàng】原时，可用【yòng】此法【fǎ】检【jiǎn】测特异性抗体。其【qí】原理【lǐ】为标本中的抗体【tǐ】和一定量的酶标【biāo】抗体比赛【sài】与固相【xiàng】抗原结合。

标本中抗体量越多【duō】，结合在【zài】固相上的酶【méi】标【biāo】抗体愈【yù】少，因而阳【yáng】性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗【kàng】原中会【huì】有干扰物质【zhì】，直接包被【bèi】不易成功【gōng】，可选用【yòng】捕【bǔ】获【huò】包被法，即先包被与固相【xiàng】抗原【yuán】相应的抗体【tǐ】，然后参与抗原，构成固相【xiàng】抗原。

洗刷除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标【biāo】抗体【tǐ】进行比【bǐ】赛结合反应。比【bǐ】赛法测抗体有多【duō】种形【xíng】式，可【kě】将标本【běn】和酶标抗【kàng】体【tǐ】与【yǔ】固相抗原比赛结合，抗HBc 。

ELISA一般选用【yòng】此【cǐ】法【fǎ】。另【lìng】一种形式为将标本【běn】与抗原一【yī】起参与【yǔ】到固【gù】相【xiàng】抗体【tǐ】中进行比赛结合，洗刷后再参与酶【méi】标抗体，与结【jié】合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般【bān】选【xuǎn】用此法。 

小分子抗原或半抗原因缺少可作夹心法【fǎ】的两个以上的位【wèi】点【diǎn】，因而不能用【yòng】双【shuāng】抗体【tǐ】夹心法进行测【cè】定，可以选用【yòng】比赛法形式。其原【yuán】理是标本中【zhōng】的【de】抗原和一定【dìng】量的【de】酶标抗原比【bǐ】赛与固相抗体结【jié】合。