1.每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好剖析.
2.显色:显【xiǎn】色体系又许多,咱们一开【kāi】始做【zuò】的时分,要选【xuǎn】择【zé】适宜的显色体系【xì】.留意显【xiǎn】色体系酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮【dàn】钠.
3.加抗体标本【běn】(和【hé】二抗):留意该换枪头时换枪【qiāng】头.标本稀【xī】释一般可用pbs稀释,也可用封闭液去稀释【shì】.如需加【jiā】二抗,还要留意【yì】二抗的作【zuò】业浓度,太高zao蹋【tà】,太低【dī】则着色浅.
4.洗涤【dí】板：可以说【shuō】在ELISA操【cāo】作中，洗刷【shuā】是zui首要的关键技术。因为聚【jù】苯乙烯【xī】等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为抵达分离游离的和结合的酶【méi】符号物的【de】目【mù】的【de】,*残留【liú】在板孔中游离的【de】物质，以及非特异性地吸附的【de】搅扰物质,在洗刷【shuā】时又应【yīng】把这种【zhǒng】非特【tè】异性吸【xī】附的【de】搅扰物质洗刷下来。所以【yǐ】在洗板时会有一定差错，人为因素【sù】很【hěn】大（当然有条件的用洗【xǐ】板机【jī】除外【wài】），洗的不*或【huò】串了孔，对如此灵敏的ELISA体系但是不小的影【yǐng】响【xiǎng】。