Q1.标曲不显色或显色很弱，样本显色：
溶解标准品以及倍比稀释时，未涡旋轰动或不可充沛。
标【biāo】准品【pǐn】溶解、倍比稀释时均需【xū】求涡旋轰动【dòng】以【yǐ】保证充沛混【hún】匀。单纯【chún】依托移液器重复吹打，效率较【jiào】低、效果也不【bú】必定jia。
Q2.样本经不同梯度稀释，ELISA试剂盒核算得到的样本值差异较大：
有【yǒu】时分咱【zán】们不【bú】清楚样本【běn】中目的蛋白的浓度怎样，应该怎样稀释，那么咱们就【jiù】会做下预实【shí】验，确认稀释倍【bèi】数。但是有时分同一【yī】样本做了【le】几个不同【tóng】梯度稀释【shì】后，核算【suàn】得到【dào】的样【yàng】本值【zhí】之间差异较大。
Q3.本底偏高：
样本值测不【bú】到标曲的本【běn】底即【jí】Blank孔的【de】OD值一【yī】般要求控【kòng】制在0.1以下【xià】(关于高敏【mǐn】ELISA可【kě】以恰【qià】当放宽要求)。尤【yóu】其是样本值特别低的【de】时分，本底过高会掩盖目的信号，导致无法测到样本值。在参加TMB显色后，需实【shí】时观【guān】察标曲显【xiǎn】se情况【kuàng】。通常在S5孔有肉眼可见【jiàn】的弱小【xiǎo】蓝色，即可【kě】中止反【fǎn】应【yīng】。
Q4.标曲显色，样本不显色：
当【dāng】样本中目的蛋【dàn】白浓度【dù】极低或者样本【běn】中搅扰要【yào】素较强，就无【wú】法检测到。现在ELISA试剂盒仍然【rán】是【shì】蛋白检测活络【luò】度gao的方【fāng】法，与不同技能结【jié】合后，衍【yǎn】生出了多种【zhǒng】类型【xíng】的ELISA，提高了检测活络度。
Q5.不同试剂盒中的组分能否通用：
除非是共用【yòng】的试剂如【rú】洗液、检测缓冲【chōng】液，其【qí】它组分不主【zhǔ】张用其它【tā】试剂盒的组【zǔ】分【fèn】，乃至是同一目标不同批次的试剂盒里的组分。这【zhè】些组分(包含标准品【pǐn】、标准品稀释液【yè】、检测抗体、酶等)都【dōu】是经过优【yōu】化【huà】的，假如轻率【lǜ】运用其它【tā】试【shì】剂盒的【de】组分，有或许对效果产生影响【xiǎng】。