技术文章您的位置:网站首页 >技术【shù】文章【zhāng】>关于ELISA试剂盒样本的大【dà】致【zhì】处【chù】理办法!!!
关于ELISA试剂盒样本的大致处理办法!!!
更新时间:2024-9-23   点击次数【shù】:1199次

一、液体样本
ELISA试剂盒液体样本处理【lǐ】准则【zé】:一切的【de】液体样本,用无菌管搜集,9-23℃条件离心20分【fèn】钟左右(2000-3000转/分【fèn】),假如今后碰【pèng】到其他的液体【tǐ】样【yàng】本,也按这个办【bàn】法,纳入汇总表。
1、血清【qīng】:用【yòng】无菌管【guǎn】搜集,室温血液自然凝结9-23分钟【zhōng】,9-23℃条件离心20分钟左【zuǒ】右(2000-3000转/分),细【xì】心搜【sōu】集上清,保存过程中如出现沉【chén】积【jī】,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择【zé】EDTA、肝素【sù】钠或柠檬酸钠作为【wéi】抗凝【níng】剂,混合9-23分钟后,9-23℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过程中如【rú】有沉【chén】积【jī】构【gòu】成,应该【gāi】再次离【lí】心【xīn】。
3、尿液【yè】:用【yòng】无菌管【guǎn】搜集,9-23℃条件离心20分钟左【zuǒ】右【yòu】(2000-3000转/分)。细心搜集上清,保存过程中如有沉积【jī】构成【chéng】,应再【zài】次离心【xīn】。
4、胸腹水:用无菌管搜【sōu】集【jí】,9-23℃条件离【lí】心20分钟【zhōng】左右(2000-3000转/分),细心【xīn】搜集【jí】上清,保存【cún】过程中如有【yǒu】沉积【jī】构【gòu】成,应再次离心。
5、脑脊液:用无【wú】菌管搜集,9-23℃条件离心【xīn】20分钟左右(2000-3000转/分),细【xì】心搜【sōu】集上清,保存过程中如有沉【chén】积构成,应再次【cì】离心。
6、唾液:用无【wú】菌管【guǎn】搜集,9-23℃条件【jiàn】离心20分钟左右(2000-3000转/分),细【xì】心搜集【jí】上清【qīng】,保【bǎo】存过程中如有沉积构成【chéng】,应【yīng】再次离心。
7、细胞培养【yǎng】上清【qīng】:检测排泄性的成【chéng】份时,用无【wú】菌【jun1】管搜集。9-23℃条件【jiàn】离【lí】心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清,保存过【guò】程中【zhōng】如有沉积构成,应【yīng】再次离心。
8、牛奶:用无菌【jun1】管搜【sōu】集,9-23℃条件离心20分钟左右(2000-3000转【zhuǎn】/分),细心搜集【jí】上清,保【bǎo】存过程中【zhōng】如有沉积【jī】构成,应再次【cì】离心。
9、蜂蜜【mì】:用无菌管搜集,9-23℃条件离【lí】心20分钟左右(2000-3000转/分),细心【xīn】搜集上清,保存过【guò】程【chéng】中如有沉积构成,应再【zài】次离【lí】心【xīn】。
10、全血:用【yòng】含有抗凝剂【jì】的无菌管搜集,当即轻轻摇摆【bǎi】,来【lái】回轻轻倒【dǎo】置【zhì】数次【cì】,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝【níng】结。 
二、固体样本
ELISA试剂盒固体【tǐ】样本处理准则【zé】:称【chēng】取1g的固体【tǐ】样【yàng】本,用【yòng】9g的适宜缓【huǎn】冲液溶解,排泄蛋白可以【yǐ】直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先搜集细胞,再【zài】用【yòng】适宜办【bàn】法破碎,离心取【qǔ】上【shàng】清测验【yàn】。
1、安排标本:切割标本后【hòu】,称取【qǔ】1g安【ān】排,参加9g的pH7.9-23.4左右的PBS,用手艺或匀浆器将标本匀【yún】浆充沛。离心20分钟左右(2000-3000转/分),细【xì】心搜集上清。分装一【yī】份待检测,其他【tā】冷【lěng】冻备用【yòng】,保存【cún】过程中如【rú】有沉积构【gòu】成,应【yīng】再次离心。关【guān】于植物安排,不好匀【yún】浆的话,就在液氮【dàn】中充【chōng】沛研磨【mó】;
2、细胞内蛋白样本
许多待【dài】测【cè】蛋白不是排泄蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先搜集细【xì】胞,洗刷干净,再破【pò】碎细【xì】胞,离心取上【shàng】清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用【yòng】PH7.9-23.4的PBS稀释【shì】细胞【bāo】悬液,使细胞浓【nóng】度到达100万【wàn】/ml左右。经过【guò】重【chóng】复冻融(假如【rú】重复冻融【róng】,破碎作用不【bú】好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏【huài】并放出细胞内成份。9-23℃条【tiáo】件离心20分钟左【zuǒ】右(2000-3000转/分),细心【xīn】搜集上清【qīng】,保【bǎo】存过【guò】程中【zhōng】如有沉积构成,应再次离心【xīn】。
B、植物【wù】细胞:用【yòng】PH7.9-23.4的PBS稀【xī】释细胞悬液,使细胞浓【nóng】度【dù】到达【dá】100万/ml左右,置于冰盒上【shàng】,用超声【shēng】破碎仪,设【shè】置破碎2s,冷却30s的方【fāng】法,充沛破碎细胞,以使细胞破坏【huài】并放出细胞【bāo】内成份。9-23℃条件离心【xīn】20分钟左【zuǒ】右(2000-3000转【zhuǎn】/分),细心搜集上清,保存【cún】过【guò】程【chéng】中如有沉积构成,应再次离心。
(2)安排的细胞
切【qiē】割标本【běn】后【hòu】,称取1g安排,参【cān】加9g的pH7.9-23.4左右的PBS,用手艺【yì】或匀浆器将标本匀浆充【chōng】沛。9-23℃条件离心20分【fèn】钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再【zài】用pH7.9-23.4左右的PBS小心【xīn】洗刷沉【chén】积的【de】细胞三遍。再【zài】用上述的细胞破碎办法破【pò】碎细胞。
3、土壤:称【chēng】取1g土壤,参加【jiā】9g的【de】pH7.9-23.4左右的PBS,用手艺将标本充沛混匀。9-23℃条件离【lí】心20分钟左右(2000-3000转/分),细心搜集上清。分装一份待【dài】检测,其【qí】他冷冻备【bèi】用,保【bǎo】存过程中如【rú】有沉积构成,应【yīng】再次【cì】离心。假【jiǎ】如【rú】是测排泄蛋白,直接取上清检【jiǎn】测,测验细胞内蛋白,要破碎细【xì】胞。
4、咽拭子:参加【jiā】2g的pH7.9-23.4左右的【de】PBS,溶解咽拭子头部,摇匀【yún】,用镊子取【qǔ】出咽拭子【zǐ】并挤干【gàn】液【yè】体,9-23℃条件离【lí】心20分钟左右(2000-3000转【zhuǎn】/分),细心搜集上清。分【fèn】装【zhuāng】一份待检测,其他冷冻备用,保存过程中如有【yǒu】沉【chén】积构【gòu】成,应再次离心。假如是测排泄【xiè】蛋白,直接取【qǔ】上清检测,测【cè】验细胞内蛋白,要破【pò】碎细胞【bāo】。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、新鲜植物安排请在液氮中充沛研磨;
2、参加样品体【tǐ】积9倍的提取液(pH?7.4?PBS缓冲液),3、?请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清【qīng】并暂【zàn】时【shí】保存【cún】于4度【dù】待用。 
三、ELISA试剂盒样本搜集注意事项
1、不能【néng】检【jiǎn】测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根【gēn】过【guò】氧化【huà】物酶的(HRP)活性。
2、标本收集【jí】后赶快进行实验,若不能【néng】马上进行实【shí】验,可将标本【běn】放于-20℃保存,但应防止重【chóng】复冻融。
3、咱们罗列的是通用的样本处理办【bàn】法,无法涵盖【gài】各种样本,关【guān】于一【yī】些特殊样本,主【zhǔ】张实【shí】验【yàn】人【rén】员【yuán】多参阅已宣布的文献,自行设计合理的样【yàng】本【běn】处理办法。

网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:沪ICP备12045995号-12   GoogleSitemap   技术支持:智慧城市网 管理登陆
© 2018 上海酶联生物科技【jì】有【yǒu】限公司(www.zjs-wm.com) 版权所有 总【zǒng】访【fǎng】问量【liàng】:747950