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酶联讲解:制备培育基的基础方法
更新【xīn】时【shí】间:2024-9-23   点击次数【shù】:996次

1、培育基pH的初步调正
 因培【péi】育基在加热消du过程中、pH会有所【suǒ】改变,培育基各成【chéng】分*溶解后【hòu】,应【yīng】进行PH的【de】初【chū】步【bù】调正。例如,牛肉浸液【yè】约可【kě】降【jiàng】低pH0.2,而肠浸液pH却会【huì】有明显的升【shēng】高。因而,对这个过程,操作者应随时留意探究经验【yàn】、以【yǐ】期能掌握培育基的终PH,确【què】保培育基的质量。PH调整后,还应将【jiāng】培【péi】育基煮【zhǔ】沸数分【fèn】钟,以【yǐ】利培育【yù】基沉淀物的析出。

2、培育基的过滤弄清
液【yè】体培育基必【bì】须弄清,琼脂培育基也应通明无【wú】明显沉淀,因而,需要采用【yòng】过【guò】滤【lǜ】或其它弄【nòng】清方法以到达此【cǐ】项要求。一【yī】般液【yè】体【tǐ】培【péi】育基可用滤纸过滤法,滤纸【zhǐ】应折叠成折扇或漏斗形,以防【fáng】止因液压不均匀而引起滤纸破裂【liè】。

3、可用清洁的白色薄绒布过滤:
亦【yì】可【kě】用【yòng】中间夹有薄【báo】层吸水【shuǐ】棉的双层纱布【bù】过【guò】滤。新制肉、肝、血和【hé】土豆等【děng】浸液时、则须先【xiān】用绒布将【jiāng】碎渣【zhā】滤去,再用滤纸重复【fù】过【guò】滤。如过【guò】滤法不能到达弄清要【yào】求、则须用蛋清弄清法【fǎ】。即将【jiāng】冷却至55~60°C的培育基放入大【dà】的三角烧瓶内,装入量不得超越烧瓶容量【liàng】的1/2,每1000ml培育基参加1~2个鸡【jī】蛋的蛋白,强力【lì】振摇3~5分【fèn】钟,置【zhì】高压蒸汽灭菌器【qì】中、121°C加热20分【fèn】钟、取出趁热以绒布过滤即可。

4、培育基的分装
培育基的分装,应按运用的目的和要求,分装【zhuāng】于【yú】试管、烧瓶等恰当【dāng】容器内。分装量不得超越容器装盛【shèng】量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还【hái】须用【yòng】防水纸包扎【zhā】(现试管一般多有用螺【luó】旋盖者)。分【fèn】装【zhuāng】时hao能运用【yòng】半【bàn】自动或电动的【de】定量分【fèn】装器【qì】。分装琼脂斜面培育基时【shí】,分装【zhuāng】量【liàng】应以能形成2/3底层【céng】和1/3斜面的量【liàng】为【wéi】洽当。分装容器应预先清洗洁净并经干烤【kǎo】消du,以利于培【péi】育【yù】基【jī】的*灭菌【jun1】。每【měi】批培【péi】育基应别的分装【zhuāng】20ml培育根【gēn】据一小玻璃【lí】瓶中,随该批培育基【jī】同【tóng】时灭菌,以为测定【dìng】该批【pī】培育基终pH之用。

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