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细胞因子检测技术应用
更新【xīn】时间【jiān】:2024-9-23   点击次数:1626次

 一、抗感染免疫中的应用

    CTL在抗病毒感染【rǎn】的免疫应答中占有主要地位,而【ér】CD4+辅【fǔ】助性T细胞【bāo】亚群Th1/Th2的【de】平衡【héng】在抵御病毒感染中起着同样重要的作用【yòng】。在HIV研究方面【miàn】,由MHC-1类分子加工【gōng】的不同抗【kàng】原经CTL识别并【bìng】产生免疫应答在控【kòng】制HIV-1感染中同样【yàng】起重要作用。利用ELISPOT方法检测CK如IFN2γ就可以进一步了【le】解到针【zhēn】对HIV特异的CTL应【yīng】答【dá】及【jí】相【xiàng】关【guān】免疫信息。 
    此外,ELISPOT法还【hái】用于评价由HIV-1感染【rǎn】引起粘膜的CD4+T细【xì】胞免疫应答以及HIVgp 120g与霍乱毒素共表达的DNA疫苗的免疫源性。在其【qí】他研究中,ELISPOT还用【yòng】来检测【cè】通【tōng】过【guò】直【zhí】肠免疫【yì】低剂【jì】量甲肝疫【yì】苗【miáo】而产生的细胞免疫应【yīng】答。在急【jí】性的自限【xiàn】性肝炎中,以【yǐ】Th1为【wéi】主的应答促进细胞【bāo】介导的免【miǎn】疫,且在【zài】控制病【bìng】毒感染及延缓慢性疾病的发展方【fāng】面有重要作用。 
    在许多抗细菌免疫研究中【zhōng】,该方法也【yě】发【fā】挥了重要作【zuò】用。例如:应用ELISPOT试验证实【shí】表达大【dà】肠杆菌【jun1】MalE蛋白的【de】重组卡介苗(rBCG.MalE)诱导的T细胞应答是CD4+T细胞依赖的,rBCG.MalE 诱导的特异CD4+T细胞应答存在Th1/Th2平衡转【zhuǎn】换【huàn】现【xiàn】象,并逐步形成Th1/ Th2 混合应答。

二、抗肿瘤免疫及相关领域中的应用

    在【zài】许【xǔ】多研究【jiū】中,该技术已被用于【yú】免疫动物外周血淋巴细胞中抗原特【tè】异的细胞毒性T细胞【bāo】(CTL)的数量【liàng】检【jiǎn】测【cè】。近期,ELISPOT技术已用于分析和【hé】评价【jià】从【cóng】传染病病人的PBMC中检【jiǎn】测肽特异的【de】T淋巴细胞以【yǐ】及【jí】在【zài】癌症病人中诱导肿瘤特异的T细胞的疫苗【miáo】试验。 
    ELISPOT检测T细胞反【fǎn】应时敏感【gǎn】性、特异【yì】性和可重复性都很【hěn】高,操【cāo】作简【jiǎn】单迅【xùn】速,需【xū】要少量标【biāo】本,在检【jiǎn】测抗原特异性【xìng】细胞数量的同【tóng】时也反应其功能,并与临床结【jié】果相关【guān】。ELISPOT平板可以提前大量准备,移液、洗板【bǎn】和读板都可自动化,因【yīn】而大批量【liàng】检查也可做到快【kuài】速。在与与其他方法的比较【jiào】后【hòu】,ELISPOT很可能成【chéng】为定【dìng】量分【fèn】析肿瘤或bing毒【dú】特异性的T细胞反应【yīng】的。

 三、细胞因子检测技术的临床应用

    目前,已经实现临床检验【yàn】的领域是【shì】对【duì】肺结核【hé】(TB)的检测。而【ér】zui近【jìn】的【de】研究热【rè】点就是对于移植的预测。受【shòu】体【tǐ】对供体特异性【xìng】HLA抗体一【yī】直以来都是器【qì】guan移植的一大【dà】障【zhàng】碍,因为它们的存【cún】在不仅介导超急【jí】性排斥反应而且还可导致急性【xìng】排斥反【fǎn】应【yīng】。因此,HLA抗体【tǐ】的存在限制了异体抗原【yuán】敏感患者对供体器官的需【xū】要,因而增【zēng】加了等待移植【zhí】的时【shí】间。在心脏,肝脏【zāng】和肾脏【zāng】异体移植后早期出现的并发症如急性排斥反应【yīng】与移植【zhí】前存在【zài】的异体免疫临【lín】床相关性迫切需要一种恰当【dāng】的检测【cè】方法【fǎ】在【zài】器guan移植【zhí】前能了解受体对【duì】供体特异性体液免【miǎn】疫的功能状态。 
    在接受移植【zhí】的人群【qún】中,部分因有多次输【shū】血、或既往有【yǒu】异体【tǐ】移植失败或多次妊【rèn】娠史体内曾经存在阳性异体抗体,在他们接受【shòu】异体移植时,现有的【de】检测方【fāng】法只能【néng】显示他们对异体的免疫功【gōng】能【néng】正常。但【dàn】他们体内存在记忆B淋巴细胞,一旦受到相应【yīng】HLA 抗原的刺激【jī】则会唤起【qǐ】免【miǎn】疫反应【yīng】,这【zhè】不仅【jǐn】影响【xiǎng】着移植的结果,甚至会出【chū】现【xiàn】危及【jí】患者生【shēng】命【mìng】的、与移植相关的【de】并发症。 
    ELISPOT是【shì】一种强有效的检测单个抗【kàng】体分泌细胞【bāo】的方【fāng】法,具有【yǒu】很高的敏感性【xìng】。因此,刺激记忆【yì】B淋巴【bā】细胞增殖、分化【huà】成浆细胞,并建立一种特【tè】异性ELISPOT方法【fǎ】检测HLA抗体产生细胞是*手【shǒu】段【duàn】。 如果ELISPOT要进一【yī】步推广应用,特别【bié】是【shì】临床应用,其标准化将是一个十分重要【yào】的问题。美国FDA和NIH等已经开始建立ELISPOT的标准【zhǔn】化流程,相信随着ELISPOT技术【shù】的成熟、标准化【huà】程【chéng】序的建立,它的【de】应用将更加【jiā】广泛。 

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