噬菌【jun1】体抗体库技术是【shì】近年【nián】发展起来的一项【xiàng】新的基因工程【chéng】抗体技术【shù】。它是将体外克隆的抗体基【jī】因片段插【chā】入噬菌体载体，转染工程细菌进行表【biǎo】达，然后用抗【kàng】原筛选即可获得特异的单克隆噬【shì】菌体抗体。利用这一【yī】技【jì】术可以得到*人源【yuán】性的抗体，在【zài】HIV等病【bìng】毒感染【rǎn】和肿【zhǒng】瘤【liú】的诊【zhěn】断与【yǔ】治疗方面【miàn】有其*的*性。  

（一）基本原理和程序
 噬菌体抗体库技术的【de】原理，简言之就是【shì】用PCR技术从【cóng】人【rén】免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变【biàn】区（VH）和【hé】轻链【liàn】可变区（VL）基因，克【kè】隆到噬菌体载体上并【bìng】以【yǐ】融【róng】合蛋白的形【xíng】式表达在其外壳表面。这样一来【lái】噬菌体【tǐ】DNA中有抗体基【jī】因的存在，同时【shí】在其表面又有抗体分子的表达，就可【kě】以方便地利用抗原—抗【kàng】体特异【yì】性结合而【ér】筛【shāi】选出【chū】所【suǒ】需【xū】要的抗体，并【bìng】进行克隆扩【kuò】增【zēng】。使抗体基因以【yǐ】分泌的方【fāng】式表【biǎo】达【dá】，则可【kě】获得可溶性的抗体片【piàn】段【duàn】。在建【jiàn】库过程中如【rú】果将VH和VI。随机组合，则可建成组合抗体文库【kù】；如果抗体mRNA来源于未经免疫的正常人，则【zé】可以在不需【xū】要细胞【bāo】融合【hé】的情况下建立起人天【tiān】然【rán】抗体库。

构建噬菌体抗体库【kù】通常包括以下几个【gè】过程：①从【cóng】外周血或脾【pí】、淋巴结等组织中分【fèn】离B淋巴细胞，提取mRNA并反转录【lù】为【wéi】cDNA；②应【yīng】用抗体轻链【liàn】和重链引【yǐn】物，根据建库的需要【yào】通过PCR技术扩【kuò】增不同【tóng】的Ig基因片段；③构建噬菌体【tǐ】载体。噬菌【jun1】体抗体库载体有入噬菌体、丝【sī】状噬菌体和噬菌【jun1】粒三种，其中后【hòu】二者是目【mù】前构建【jiàn】表面表达的【de】噬【shì】菌体抗【kàng】体库（surfacedisplayantibody library）常用载体；④表达载体【tǐ】转化细菌，构建全【quán】套抗体【tǐ】库。通过多轮的【de】抗原亲和吸附【fù】—洗脱—扩增，zui终【zhōng】筛选出【chū】抗原【yuán】特异的【de】抗【kàng】体克【kè】隆【lóng】。
 
（二）噬菌体抗体库技术的特点

1．避免使【shǐ】用人【rén】工免【miǎn】疫和杂交瘤技【jì】术  由于抗【kàng】体库的大【dà】容量和*的筛选效率【lǜ】，使得可以【yǐ】调出任意抗体【tǐ】基因，用基因工程方法制备抗【kàng】体，从而避免了【le】使用人工【gōng】免疫动物和【hé】细胞融【róng】合技术。

2．模【mó】拟天然全套【tào】抗体库【kù】  抗【kàng】体文库可以达到或超过1011库容，所【suǒ】以能包含B细胞全【quán】部克【kè】隆。建【jiàn】库【kù】的外源基因来自人体外周血，骨髓【suǐ】或脾脏的【de】淋巴细【xì】胞提取的mmDNA，mmDNA反转录形【xíng】成cDNA，这些mRNA是人体多克隆【lóng】细胞的总mRNA。使用【yòng】的通【tōng】用引物采自多【duō】个人体，具有【yǒu】人的种属【shǔ】普【pǔ】遍性。抗体的VH和VL基因的随机重组也【yě】增【zēng】加【jiā】了抗体的多【duō】样性。

3．可获得高亲和力【lì】的【de】人源【yuán】化【huà】抗体  在中，VH和VL基因的随机重组【zǔ】模拟了体【tǐ】内抗体亲和力成熟的过程，所用的【de】抗【kàng】体【tǐ】基因又来自人体，因此，所产【chǎn】生的抗【kàng】体必然都是高亲和力的【de】人源化抗体。