上月中旬，贵州大【dà】学【xué】王老师在我司订【dìng】购了【le】小鼠免疫【yì】球M(IgM)elisa试剂【jì】盒。实验结束后【hòu】，反映阳【yáng】性【xìng】对照、质控在【zài】内的【de】所有板孔颜【yán】色均较淡。这【zhè】是什么原因造成的?我司技术分析如下：

1. 试剂【jì】盒必须在有【yǒu】效期内使用， 超【chāo】过有效期的【de】产品可能【néng】会产生很弱的信【xìn】号；

2. 试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响；

3. 试剂、样品用前未平衡至室温；

4. 加入试【shì】剂的【de】体积和时间【jiān】有误， 移液【yè】器计量不【bú】准，吸嘴内水【shuǐ】分太多或不清洁【jié】；

5. 洗【xǐ】板及加样过程中，酶标受【shòu】污染失活而【ér】失去【qù】催化显色剂显色的【de】能力【lì】；

6. 孵育【yù】时间及【jí】孵育温度【dù】未达到要求 ，反应板放【fàng】入【rù】培养箱【xiāng】时注意温度并及时【shí】调整；

7. 洗板次数【shù】过多，或浓【nóng】缩洗液稀释倍数不符合要求；洗涤【dí】冲【chōng】击力太【tài】大。浸泡时【shí】间太长；

8. 显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入；

9. 底物作用时间不够；

10. 蒸馏水水质有问题；

实验【yàn】前检查【chá】试剂的组分及批号，确认【rèn】试【shì】剂未过期。不【bú】要【yào】将试剂【jì】盒长时【shí】间置于常温下，按使用规定储藏。

确定【dìng】所使用的试剂【jì】体积正确，加【jiā】入时间适当。校正移液器【qì】，移液器与吸嘴配合要紧密吻【wěn】合。移液【yè】不【bú】宜太快，排放应【yīng】*。

确认盛酶【méi】标【biāo】的容器不【bú】含酶抑制剂如【rú】叠氮钠等，确认配制洗液【yè】的容器【qì】已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到【dào】要求【qiú】且【qiě】未【wèi】受污染。

孵育【yù】温【wēn】度应控制在9-23℃，孵育【yù】时间严格按照说明【míng】书操作。保温【wēn】期内不宜多开【kāi】门，以免影响【xiǎng】保温。

严【yán】格按说明书要求稀释浓缩【suō】洗液及【jí】洗板，减小洗涤冲击力，按说【shuō】明【míng】书要求置留洗涤液【yè】时间和【hé】洗涤次数。

显色【sè】剂滴【dī】瓶垂【chuí】直向下【xià】，持力均匀，滴【dī】速不【bú】宜过快，先加显【xiǎn】色剂 A，后加【jiā】显色剂B，不可将A、B液混合后加入准确定【dìng】时间。