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ELISA试剂盒实验样本收集准备小结
更新时间:2024-9-24   点击次数:1107次【cì】

ELISA试剂盒样本实验准备:

在【zài】收集【jí】样本前都必须有一个【gè】完整的计划,必须清【qīng】楚要检测的成份是【shì】否足够稳定。对收【shōu】集后当天就进行检测的样本,及时储存【cún】在4℃备用。对于隔天再【zài】检测的样【yàng】本,及时【shí】分【fèn】装后冻存【cún】在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应【yīng】避免【miǎn】反复【fù】冻融。

 

液体类标本:  包括血清【qīng】、血浆、尿液【yè】、胸腹【fù】水、脑脊液、细【xì】胞【bāo】培【péi】养上清等。

 

1.  血清:室温血液自然凝固9-24分钟【zhōng】后,离心20分钟【zhōng】左右(2000-3000转【zhuǎn】/分)。仔细收【shōu】集上清。保存【cún】过【guò】程中如有沉淀形成,应【yīng】再次离心【xīn】。

 

2.  血【xuè】浆【jiāng】:应【yīng】根据标本【běn】的要【yào】求【qiú】选择EDTA、柠檬酸钠或肝素【sù】作为抗凝剂,混【hún】合9-24分钟后,离心【xīn】20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集【jí】上清。保存过程中如有沉淀形成【chéng】,应再次离心。

 

3.  尿液:用【yòng】无【wú】菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集【jí】上清。保存过【guò】程中如有沉淀形成,应再【zài】次离心。胸腹水、脑脊液【yè】参照【zhào】此实行。

 

4.  细【xì】胞培养【yǎng】上清:检测分泌性的【de】成份【fèn】时,用无菌管收【shōu】集。离心20分【fèn】钟【zhōng】左右(2000-3000转/分)。仔【zǎi】细收集上清。

 

5.  培养细胞:检测【cè】细【xì】胞内的成份时,用【yòng】PBS(PH7.9-24.4)稀释细胞悬【xuán】液,细【xì】胞浓度达到100万【wàn】/ml左右。通过【guò】反复冻融或加入【rù】组织蛋白萃取试剂【jì】,以使细胞破【pò】坏并放【fàng】出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细【xì】收【shōu】集上清。保【bǎo】存过程中如有沉淀【diàn】形成【chéng】,应【yīng】再次【cì】离心。

 

6.  组织标本【běn】:切割标本后【hòu】,称【chēng】取重量【liàng】。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅【xùn】速冷冻【dòng】保存备用。标本融化后仍然保【bǎo】持9-24℃的温度。加入一定量的【de】PBS(PH7.4),或组【zǔ】织蛋白萃取【qǔ】试剂, 用手工或匀【yún】浆【jiāng】器【qì】将标本匀浆化。离心20分钟左右【yòu】(2000-3000转/分)。仔细【xì】收【shōu】集上清。分【fèn】装【zhuāng】后一份待【dài】检【jiǎn】测,其余冷冻备用。

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