培养细胞的形态结构

组织培【péi】养细【xì】胞形态结构【gòu】与体内细胞基本【běn】相【xiàng】同，但在大体形态【tài】以及【jí】某些【xiē】细微结构方面仍存在【zài】着一定的差异。

(一)形态分类

根【gēn】据细胞是【shì】否贴附于支持物上生长，形态【tài】有所不同。呈悬浮生【shēng】长【zhǎng】时，不论【lùn】细胞原来源【yuán】于体内何种类【lèi】型【xíng】细胞．由于生长在液体环境【jìng】中【zhōng】，胞【bāo】体基本呈圆【yuán】形。大多数细胞是贴附型生长【zhǎng】的。当细胞贴附在支持物上后，细胞分化现象常【cháng】变得不【bú】显著，易【yì】失去【qù】它们【men】在体内时的原有特征．在形态上表现单一【yī】化的【de】现【xiàn】象。贴附于支持物【wù】表面后，开始仍为圆形【xíng】，但为时很短【duǎn】，很快便经过【guò】形态演变【biàn】过渡成扁平形态。

1．成纤【xiān】维细胞【bāo】型：此细【xì】胞形态与【yǔ】体内成纤【xiān】维细胞的相似而得【dé】名，胞【bāo】体呈梭形或不规则三角形，中央有卵圆【yuán】形核【hé】，胞质【zhì】向【xiàng】外伸出2～3个长短【duǎn】不齐【qí】的突起。细【xì】胞在【zài】生长时呈放射状火焰状【zhuàng】或旋涡状走【zǒu】行，除真【zhēn】正的【de】成【chéng】纤维细胞外【wài】，凡由中胚层间充质起源【yuán】的组织，如心【xīn】肌、平滑肌、成【chéng】骨细胞、血管内皮等细胞常呈此【cǐ】形态。

2．上皮【pí】组织型：本型细胞呈扁平不规则多角形【xíng】，中有圆形核。细【xì】胞彼此紧密相【xiàng】连成单层膜，生长时呈膜状移动；处于上皮【pí】膜【mó】边缘的【de】细【xì】胞总【zǒng】与膜相连【lián】，很少脱【tuō】离细【xì】胞群【qún】单独活【huó】动；起源于内、外胚层细【xì】胞如皮肤表层、消化层上皮、肝、胰、肺泡上皮【pí】等【děng】皆呈上皮型形【xíng】态。

3．游走细【xì】胞型：此型细胞在支持【chí】物上散在生长，一般不【bú】连接【jiē】成片，细胞质经【jīng】常伸【shēn】出伪足或突起，呈【chéng】活跃地游走【zǒu】或变形运动。此型细胞【bāo】不很稳定．有时亦难【nán】和其他【tā】型细胞【bāo】相区【qū】别，在【zài】一定条【tiáo】件下，如培养【yǎng】基化学性质变动等【děng】，它们【men】也可能呈成纤【xiān】维细【xì】胞形态。

4．多形【xíng】细胞型：有一些组织和细胞【bāo】，如神经组织的细【xì】胞等，难以【yǐ】确定【dìng】它们规律【lǜ】和稳定【dìng】的形【xíng】态，可【kě】通归人多【duō】形细胞型。

(二)显措丝袖

在一般【bān】光学显微镜下直接【jiē】观【guān】察体【tǐ】外培养健康活【huó】细【xì】胞【bāo】时，细胞是均【jun1】质而透明的，结构极不【bú】明显。只有【yǒu】用相差显微镜才【cái】能看清细【xì】胞【bāo】轮廓和内部结【jié】构。培养中细【xì】胞一般有1～2个核仁。用【yòng】固定染色法和特殊技术可显示出细胞【bāo】器【qì】等结构，但在生活时的细胞中却不易观【guān】察到。在细如【rú】机能【néng】状【zhuàng】态【tài】不良时，细胞【bāo】轮廓会【huì】增强，反【fǎn】差增大。在胞质中时而出现颗粒、脂滴和空泡【pào】等，是【shì】细胞代谢【xiè】不良的表【biǎo】现；反差很大的暗色小颗粒是变形的线粒体【tǐ】。细胞形态结构与细胞在【zài】体外【wài】生存时间的长短、细胞种类等有直接【jiē】关系。初代培【péi】养的正常二倍【bèi】体细【xì】胞，除大【dà】体形态外．在构造【zào】和生物学性状上与原体内细胞近似性【xìng】大，细胞【bāo】均质性和透明度都很强。随细【xì】胞在体外【wài】生活时间的延长和反复传代。正常二倍体【tǐ】细胞会发生【shēng】一定的【de】变化。其【qí】核【hé】型【xíng】发生变化【huà】时【shí】．则产生【shēng】多倍体或异【yì】倍体【tǐ】细胞。形态上轮廓增强、核仁增多、有时出现【xiàn】双核【hé】或【huò】多【duō】核巨细【xì】胞等。如细胞发生转化，它【tā】们的形态发生的变化更【gèng】大【dà】。

培养细胞形【xíng】态学上的特【tè】征只可以在接种对象【xiàng】明确的情况下，大致【zhì】表明【míng】出细胞的【de】类型。如【rú】果【guǒ】要确认培【péi】养物细胞的种类，必须借助特异性的鉴别方法加以识【shí】别。常用【yòng】细【xì】胞的某种特【tè】异性蛋白【bái】质或【huò】肽的抗【kàng】体进行免疫【yì】细胞化学染色鉴定。

(三)超微结构

透【tòu】射【shè】电镜下，一【yī】般【bān】看不到培养细胞与体内【nèi】的细胞形态结【jié】构【gòu】方面的明显【xiǎn】差异【yì】。培养细胞膜亦分为三层结构，总【zǒng】厚度约7．5nm，由双层类【lèi】脂分子组成【chéng】，双层分【fèn】子间嵌有蛋白【bái】质分子。细胞膜向外凸【tū】出形【xíng】成【chéng】泡状、叶状、丝状和指状突起，长度比【bǐ】较【jiào】一致，称微绒毛。随细胞类型、正常或异常(肿【zhǒng】瘤细胞【bāo】)，以及处于周期阶段不【bú】同，微绒毛的【de】形状和【hé】数量均【jun1】有差别。细胞间存在着一定的间隙，成【chéng】纤维细胞之间的间隙不【bú】恒【héng】定，上皮细胞相互之间一般有1.5～15nm的间隙。细胞相互接触部并【bìng】可【kě】见到【dào】桥粒(desmcsome)。细胞【bāo】膜【mó】表面常【cháng】附有由细胞分泌形【xíng】成的糖蛋白膜，即细【xì】胞外衣。在【zài】细胞膜下面有一层厚【hòu】100～500n。m的胞质【zhì】区，称为【wéi】膜下皮质【zhì】层，该层【céng】具有中等电子密【mì】度，其中常【cháng】见有直径5～7nm的微丝。微丝在膜下皮质层【céng】中分布甚【shèn】广，它们主【zhǔ】要由【yóu】多聚肌【jī】纤蛋【dàn】白组成。线【xiàn】粒体、内质网、高尔基氏复合体【tǐ】、中心【xīn】体和溶酶体等多集【jí】中在细胞质内，它们的形【xíng】态【tài】结构与体【tǐ】内细胞相似，但常随【suí】细【xì】胞生长【zhǎng】状态不同【tóng】有很大变化。细胞核【hé】超微结构与体内【nèi】细胞无大差【chà】别。永生性细胞【bāo】系和肿瘤【liú】细胞的细胞核一般【bān】比较【jiào】大，染【rǎn】色质比【bǐ】较丰富，核仁【rén】大而多。